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吊瓜組培育苗方法

文檔序號(hào):557387閱讀:1604來(lái)源:國(guó)知局
專(zhuān)利名稱(chēng):吊瓜組培育苗方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種植物組織培養(yǎng)方法,特別涉及一種借助于基本培養(yǎng)基附加不同成分對(duì)吊瓜進(jìn)行工廠化快速繁殖的吊瓜組培育苗方法。屬植物組織培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)
吊瓜,又名栝樓(Trivbosantnes Kirilouii),系葫蘆科栝樓屬,是多年生宿根草質(zhì)藤本植物,在我國(guó)已有多年種植歷史,吊瓜有藥用吊瓜和食用吊瓜(主要收獲瓜籽),根椐《本草綱目》記載,吊瓜有健胃、潤(rùn)肺、化痰、散節(jié)、滑潤(rùn)作用,主治痰熱咳嗽、肺痰咳血、胸悶、消瀉和便秘等癥,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明。吊瓜籽還有消炎、抗癌功效,上??茖W(xué)技術(shù)文獻(xiàn)出版社的《抗癌新法精編》介紹,其對(duì)肺癌、胃癌、胰島素乳腺癌療效顯著。吊瓜籽營(yíng)養(yǎng)豐富,其中蛋白質(zhì)、脂肪、纖維素、微量元素及生物堿、黃酮類(lèi)、疳類(lèi)和有機(jī)類(lèi)等含量頗豐,是不可多得的藥膳食品,長(zhǎng)期食用有益健康,其籽炒制后香味適口,是天然綠色保健品,因而市場(chǎng)需求大,供不應(yīng)求,價(jià)格攀升。
吊瓜不但有食用和藥用價(jià)值,還是一種優(yōu)良的遮蔭、觀果的綠化品種,6~9月果未成熟時(shí)濃蔭遮日,未成熟的吊瓜淡綠色,表覆青黑色的狹條斑,9月以后,果實(shí)呈橙紅色,有光澤,十分醒目耀眼,可廣泛應(yīng)用于公園的池塘邊做垂吊遮蔭,也可作為休閑遮蔭棚架植物,形成風(fēng)格獨(dú)特的一景。
食用吊瓜是浙江長(zhǎng)興一帶農(nóng)民自發(fā)從野生吊瓜資源馴化而來(lái)農(nóng)家品種。它雌雄異株,目前吊瓜的繁殖生產(chǎn)上主要靠種子播種法和2~3年生塊根切段繁殖,以塊根繁殖為主。用種子播種繁殖,不結(jié)果的雄株占自然繁殖的幼苗的70%左右,育苗成本高,繁殖率低。用塊根切段繁殖,由于受到塊根數(shù)量的限制,繁殖效率低,且費(fèi)工費(fèi)時(shí),直接影響種植面積的擴(kuò)大,優(yōu)良品種的推廣。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述不足,提供一種繁殖周期短,繁殖系數(shù)高的吊瓜組培育苗方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種吊瓜組培育苗方法,其特征在于該法包括以下工藝步驟步驟一、外植體的選取在春夏之交取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖為外植體;步驟二、外植體的處理剪取芽或藤狀莖,去除藤狀莖上的葉片及卷須,切成一葉莖段,流水沖洗20~30分鐘,用潔凈干紗布吸干表面水分,在超凈工作臺(tái)內(nèi),用70%~75%的酒精浸泡10~15秒,倒出酒精液,用無(wú)菌水沖洗1~2遍,再用0.1%的氯化汞溶液振蕩消毒8~10分鐘,再用無(wú)菌水沖洗3~4次,用無(wú)菌紗布吸干表面水分,最后剪去接觸藥液的莖段兩端少許,待接種;
步驟三、外植體接種將步驟二得經(jīng)消毒并整理好的芽或莖段,按生物學(xué)極性方向接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi),每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段,培養(yǎng)瓶I內(nèi)的培養(yǎng)基I由MS+BA0.1~0.5+KT0.01~0.2+IAA0.05~0.2+0.5%的瓊脂粉+2~3%的蔗糖組成,用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8~6.0,接種好芽或莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的培養(yǎng)室,培養(yǎng)25~30天,即可長(zhǎng)成4~5節(jié)帶葉莖蔓;步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓又剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi),每瓶插單莖段4~6個(gè)。
培養(yǎng)瓶II內(nèi)的培養(yǎng)基II由MS+BA0.3~0.5+KT0.2~0.3+NAA0.01~0.1+0.5%的瓊脂粉+2~3%的蔗糖組成,用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8~6.0,接種好莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的條件下培養(yǎng)25~30天,可長(zhǎng)成4~5節(jié)帶葉莖蔓,如此反復(fù)繼代,則小苗按幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),直到達(dá)到目標(biāo)苗數(shù);步驟五、生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi),每瓶插10個(gè)莖段,培養(yǎng)瓶III內(nèi)的培養(yǎng)基III由MS0+0.6%瓊脂+15~20%蔗糖組成,接種好莖段的培養(yǎng)瓶III放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的條件下培養(yǎng)20~30天,即可100%的生根;
本發(fā)明在已知結(jié)瓜的株上選取芽或莖納入組培繁殖體系,則可源源不斷地為生產(chǎn)提供優(yōu)質(zhì)種苗,滿足生產(chǎn)的需求。用本發(fā)明組培吊瓜育苗方法具有繁殖周期短,繁殖系數(shù)高,25~30天為一周期,繁殖系數(shù)3~4倍,周年生產(chǎn),1個(gè)芽可生產(chǎn)數(shù)萬(wàn)株苗,節(jié)約大量2~3年生的塊根,克服了籽播雌株率低(約30%左右),幼苗需1年以上待籽播苗結(jié)果才能確定,浪費(fèi)人力、物力、地力,采用組培育苗方法完全可滿足吊瓜苗的規(guī)?;a(chǎn)的要求。因此,本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了優(yōu)質(zhì)高效吊瓜的生產(chǎn)規(guī)?;?。
具體實(shí)施例方式
下面為本發(fā)明采用食用吊瓜組培育苗方法的最佳方式步驟一、外植體的選取在5月份取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖。
步驟二、外植體的處理剪取芽或藤狀莖,去除藤狀莖上的葉片及卷須,切成一葉莖段,先用1%洗潔精液振蕩洗滌8分鐘,再流水沖洗30分鐘,用潔凈干紗布吸干表面水分。在超凈工作臺(tái)內(nèi),把芽或莖段放入經(jīng)高壓滅菌的廣口瓶?jī)?nèi),先用70%的酒精浸泡10秒,倒出酒精液,用無(wú)菌水沖洗2遍,再用0.1%的氯化汞溶液振蕩消毒10分鐘,再用無(wú)菌水沖洗4次,每次不少于4分鐘,倒去無(wú)菌水洗液,用無(wú)菌紗布吸干表面水分,最后剪去接觸藥液的莖段兩端少許,待接種。
步驟三、外植體接種將步驟二得經(jīng)消毒并整理好的芽或莖段,按生物學(xué)極性方向接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi),每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段。
培養(yǎng)瓶I內(nèi)的培養(yǎng)基I由MS+BA0.3+KT0.1+IAA0.1+0.5%的瓊脂粉+3%的蔗糖組成,用1NNaOH或1N HCl調(diào)pH值6.0,接種好芽或莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25℃、光照2000lx、光照12小時(shí)、黑暗12小時(shí)的環(huán)境中培養(yǎng)30天,可長(zhǎng)成4~5節(jié)帶葉莖蔓。
步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi),每瓶插單莖段4~6個(gè)。
培養(yǎng)瓶II內(nèi)的培養(yǎng)基II由MS+BA0.3+KT0.2+NAA0.1+0.5%的瓊脂粉+3%的蔗糖組成,用1NNaOH或1N HCl調(diào)pH值6.0,接種好莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照2000lx、光照12小時(shí)、黑暗12小時(shí)的環(huán)境中培養(yǎng)30天,可長(zhǎng)成4~5節(jié)帶葉莖蔓,如此反復(fù)繼代,則小苗按幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),直到達(dá)到目標(biāo)苗數(shù)。
步驟五、生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi),每瓶插10個(gè)莖段。
培養(yǎng)瓶III內(nèi)的培養(yǎng)基III由MS0+0.6%瓊脂+15%蔗糖組成,接種好莖段的培養(yǎng)瓶III放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的條件下培養(yǎng)20天左右,即可100%的生根。
步驟六、移栽煉苗把步驟五得培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的苗小心取出,沖洗干凈根上瓊脂,移栽在50穴的穴盤(pán)內(nèi),穴盤(pán)內(nèi)裝有經(jīng)800~1000倍敵克松溶液消毒的基質(zhì)內(nèi),基質(zhì)由珍珠巖∶蛭石∶草炭土=1∶1∶1。移栽后淋透1000倍多菌靈,遮光5~7天,濕度保持90%以上,溫度20~25℃。移栽后8~15天,早晚見(jiàn)光,中午遮蔭,噴一次1000倍多菌靈液,保持濕度80~90%,溫度20~25℃。移栽后16~23天,逐漸增加光照直到全日照,保持濕度60~70%,噴一次1000倍多菌靈液+0.3%磷酸二氫鉀液,保持溫度在25℃左右,新白根生根、葉片蠟質(zhì)層形成,逐漸適應(yīng)外界環(huán)境,煉苗即完成,可上缽培養(yǎng)10~15天,即可下田移栽。
權(quán)利要求
1.一種吊瓜組培育苗方法,其特征在于該法包括以下工藝步驟步驟一、外植體的選取在春夏之交取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖為外植體;步驟二、外植體的處理剪取芽或藤狀莖,去除藤狀莖上的葉片及卷須,切成一葉莖段,流水沖洗20~30分鐘,用潔凈干紗布吸干表面水分,在超凈工作臺(tái)內(nèi),用70%~75%的酒精浸泡10~15秒,倒出酒精液,用無(wú)菌水沖洗1~2遍,再用0.1%的氯化汞溶液振蕩消毒8~10分鐘,再用無(wú)菌水沖洗3~4次,用無(wú)菌紗布吸干表面水分,最后剪去接觸藥液的莖段兩端少許,待接種;步驟三、外植體接種將步驟二得經(jīng)消毒并整理好的芽或莖段,按生物學(xué)極性方向接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi),每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段,培養(yǎng)瓶I內(nèi)的培養(yǎng)基I由MS+BA0.1~0.5+KT0.01~0.2+IAA0.05~0.2+0.5%的瓊脂粉+2~3%的蔗糖組成,用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8~6.0,接種好芽或莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的培養(yǎng)室,培養(yǎng)25~30天,即可長(zhǎng)成4~5節(jié)帶葉莖蔓;步驟四、繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓又剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi),每瓶插單莖段4~6個(gè),培養(yǎng)瓶II內(nèi)的培養(yǎng)基II由MS+BA0.3~0.5+KT0.2~0.3+NAA0.01~0.1+0.5%的瓊脂粉+2~3%的蔗糖組成,用NaOH或HCl調(diào)pH值5.8~6.0,接種好莖段的培養(yǎng)瓶放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的條件下培養(yǎng)25~30天,可長(zhǎng)成4~5節(jié)帶葉莖蔓,如此反復(fù)繼代,則小苗按幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),直到達(dá)到目標(biāo)苗數(shù);步驟五、生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi),每瓶插10個(gè)莖段,培養(yǎng)瓶III內(nèi)的培養(yǎng)基III由MS0+0.6%瓊脂+15~20%蔗糖組成,接種好莖段的培養(yǎng)瓶III放在溫度25±2℃、光照1500~2500lx、光照10~12小時(shí)、黑暗12~14小時(shí)的條件下培養(yǎng)20~30天,即可生根。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種吊瓜組培育苗方法,包括以下工藝步驟1.外植體的選取在春夏之交取吊瓜塊根上萌發(fā)的芽或藤狀莖為外植體;2.外植體的處理剪取芽或藤狀莖,去除藤狀莖上的葉片及卷須,切成一葉莖段,待接種;3.外植體接種將步驟二得芽或莖段,接種在裝有培養(yǎng)基I的培養(yǎng)瓶I內(nèi),每瓶接種一個(gè)芽或一個(gè)莖段,4.繼代培養(yǎng)將步驟三得帶葉莖蔓又剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基II的培養(yǎng)瓶II內(nèi),每瓶插單莖段4~6個(gè);5.生根培養(yǎng)將上述步驟四得帶葉莖蔓剪成一葉莖段,接種在裝有培養(yǎng)基III的培養(yǎng)瓶III內(nèi),每瓶插10個(gè)莖段,培養(yǎng)20~30天,即可生根。本發(fā)明繁殖周期短,繁殖系數(shù)高。
文檔編號(hào)C12N5/04GK1985582SQ200610161470
公開(kāi)日2007年6月27日 申請(qǐng)日期2006年12月18日 優(yōu)先權(quán)日2006年12月18日
發(fā)明者吳有光, 方建民, 劉喚英 申請(qǐng)人:江蘇陽(yáng)光生態(tài)農(nóng)林開(kāi)發(fā)股份有限公司
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