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以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝的制作方法

文檔序號:457295閱讀:402來源:國知局
以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝。具體步驟如下:將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株,對其進(jìn)行紅外線的誘變處理;培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)不能低于百分之十;再對其進(jìn)行紫外誘變,選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度;搖瓶發(fā)酵,初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度至少為百分之八;運(yùn)用雙層紗膜進(jìn)行透析;加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)其PH為4-7范圍內(nèi);再次進(jìn)行傳代實(shí)驗(yàn),3-5次,即可。所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點(diǎn)五至百分之八點(diǎn)二;所選用的接種菌齡應(yīng)該為其生長后期。本發(fā)明的有益效果是:產(chǎn)酶反應(yīng)活度高,變化比較平穩(wěn),有效減少了發(fā)酵過程中代謝物的產(chǎn)生以及其對產(chǎn)物合成的阻礙作用。
【專利說明】以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生化物質(zhì)的制備方法,具體來說,是指以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝。
【背景技術(shù)】
[0002]葡萄糖氧化酶(G I u c ο s eOxidase,簡稱G0D)系統(tǒng)名為β _D_葡萄糖:氧化還原酶(EC1.1.3.4)它能專一地將β -D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和過氧化氫。葡萄糖氧化酶是酶【技術(shù)領(lǐng)域】中一種非常重要的酶,由于葡萄糖氧化酶與生命重要物質(zhì)葡萄糖和氧的密切關(guān)系,導(dǎo)致了它在科研、醫(yī)藥和食品工業(yè)生產(chǎn)上廣泛的應(yīng)用。20世紀(jì)初Maximou在黑曲霉培養(yǎng)物中發(fā)現(xiàn)吸氧酶系統(tǒng)。1924年Malliard發(fā)現(xiàn)了葡萄糖酸。1928年,Muller用黑曲霉菌絲體壓制進(jìn)行葡萄糖酸形成的酶學(xué)研究,探明在葡萄糖存在時(shí)能消耗氧,并命名為葡萄糖氧化酶,把它歸入脫氫酶。以后許多研究者對該酶的性質(zhì)作了大量的工作,尤其對葡萄糖氧化酶的輔基一黃素腺嘌呤二核苷酸(FAD)作了深入的研究,并給予詳細(xì)的說明。BentleyNeubergar應(yīng)用同位素1802.2180明確了在有過氧化氫酶存在下的一系列試驗(yàn)。Keilin等對黑曲霉的葡萄糖氧化酶的動力學(xué)及其作用形式也作了較詳細(xì)的研究。1961年國際生化協(xié)會酶委員會將該酶的系統(tǒng)名稱叫做(β -D-萄萄糖-氧化還原酶(EC1.1.3.4)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為克服上述技術(shù)問題,我們提出了以下技術(shù)方案: 以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝,具體步驟如下:
將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株,對其進(jìn)行紅外線的誘變處理; 培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)不能低于百分之十;
再對其進(jìn)行紫外誘變,選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度;
搖瓶發(fā)酵,初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度至少為百分之八;
運(yùn)用雙層紗膜進(jìn)行透析;
加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)其PH為4-7范圍內(nèi);
再次進(jìn)行傳代實(shí)驗(yàn),3-5次,即可。
[0004]本發(fā)明中,所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點(diǎn)五至百分之八點(diǎn)二。
[0005]本發(fā)明中,所選用的接種菌齡應(yīng)該為其生長后期。
[0006]本發(fā)明的有益效果是:產(chǎn)酶反應(yīng)活度高,變化比較平穩(wěn),有效減少了發(fā)酵過程中代謝物的產(chǎn)生以及其對產(chǎn)物合成的阻礙作用。
【具體實(shí)施方式】
[0007]以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝,具體步驟如下:
將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株,對其進(jìn)行紅外線的誘變處理; 培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)為百分之十;再對其進(jìn)行紫外誘變,選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度;
搖瓶發(fā)酵,初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度為百分之八;
運(yùn)用雙層紗膜進(jìn)行透析;
加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)其PH為6范圍內(nèi);
再次進(jìn)行傳代實(shí)驗(yàn),5次,即可。
[0008]所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點(diǎn)五。
[0009]所選用的接種菌齡應(yīng)該為其生長后期。
[0010]以上所述,僅為本發(fā)明較佳的【具體實(shí)施方式】,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此,任何熟悉本【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi),根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變, 都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝,其特征在于,具體步驟如下: 將原料木糖醇作為發(fā)酵生產(chǎn)葡萄糖氧化酶的出發(fā)菌株,對其進(jìn)行紅外線的誘變處理; 培養(yǎng)基中的初糖濃度質(zhì)量分?jǐn)?shù)不能低于百分之十; 再對其進(jìn)行紫外誘變,選擇具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度; 搖瓶發(fā)酵,初定葡萄糖氧化酶膜過濾發(fā)酵工藝中的初糖濃度至少為百分之八; 運(yùn)用雙層紗膜進(jìn)行透析; 加入氯化氫或者氫氧化鈉溶液,調(diào)節(jié)其PH為4-7范圍內(nèi); 再次進(jìn)行傳代實(shí)驗(yàn),3-5次,即可。
2.如權(quán)利要求1所述的以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝,其特征在于,所述具有最佳產(chǎn)酶的葡萄糖濃度為百分之七點(diǎn)五至百分之八點(diǎn)二。
3.如權(quán)利要求1所述的以木醇糖作為原料對葡萄糖氧化酶進(jìn)行發(fā)酵的工藝,其特征在于,所選用的接種菌齡應(yīng)該為其`生長后期。
【文檔編號】C12N9/04GK103627682SQ201310588368
【公開日】2014年3月12日 申請日期:2013年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月21日
【發(fā)明者】周懂懂 申請人:周懂懂
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