一種云南地方晾曬煙中黃酮類(lèi)化合物及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于植物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種源于云南地方晾曬煙中黃酮類(lèi)化合 物及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 云南地方晾曬煙是煙草的云南特有變種,煙草從明萬(wàn)歷末年進(jìn)入云南,至清乾隆 年間成為當(dāng)?shù)爻R?jiàn)的農(nóng)作物。云南自然條件好,溫暖的河谷,冷涼的半山區(qū)、山區(qū)都適應(yīng)煙 草的生長(zhǎng)。而且由于云南氣候及地理環(huán)境多樣,所以煙草在多年的栽培過(guò)程中形成了很多 個(gè)具有地方特色的晾曬煙品種,其中著名的有:羅平八大河煙、師宗五洛河煙、會(huì)澤樂(lè)業(yè)煙、 蒙自新安所煙、富源大河煙、大姚趙戶沖煙、云龍?zhí)斓菬?、賓川白塔煙、巍山南門(mén)煙、南澗樂(lè) 居煙、騰沖綺羅生煙等。這些晾曬煙在當(dāng)?shù)爻Ja(chǎn)不衰,但其次生代謝產(chǎn)物的研宄還從未見(jiàn) 報(bào)道過(guò)。
[0003] 黃酮(flavone),是黃酮類(lèi)化合物的總稱(chēng),泛指兩個(gè)具有酚羥基的苯環(huán)(A-環(huán)與 B-環(huán))通過(guò)中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物。研宄表明,黃酮類(lèi)化合物具有心 血管系統(tǒng)活性、抗菌及抗病毒活性、抗腫瘤活性、抗氧化自由基活性、抗炎、鎮(zhèn)痛、抗變態(tài)等 多種藥理活性。同時(shí)已有研宄證實(shí),其藥理作用與化學(xué)結(jié)構(gòu)密切相關(guān),為了研宄這類(lèi)化合物 的構(gòu)效關(guān)系,可進(jìn)一步研宄和開(kāi)發(fā)更多的黃酮類(lèi)化合物,從中尋找有效的先導(dǎo)化合物和活 性基團(tuán)。本發(fā)明從云南地方晾曬煙中分離得到了一種新的黃酮類(lèi)化合物,該化合物至今尚 未見(jiàn)到相關(guān)報(bào)道,值得一提的是該化合物具有顯著的抗輪轉(zhuǎn)病毒活性。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004] 本發(fā)明的第一方面在于提供一種結(jié)構(gòu)新穎的的黃酮類(lèi)化合物,其分子式為 C21H1605,經(jīng)過(guò)分析化學(xué)鑒定,其具有下述結(jié)構(gòu):
[0005]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 如式(I)所示黃酮類(lèi)化合物,該化合物命名為煙草黃酮-E,其分子式為C21H1605,且 具有下述結(jié)構(gòu):
2. 權(quán)利要求1所述的黃酮類(lèi)化合物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: 以晾曬煙葉片為原料,先制備煙草提取物浸膏,再用硅膠柱層析法處理所述煙草提取 物浸膏以得到洗脫液,然后使該洗脫液經(jīng)過(guò)高壓液相色譜分離,以得到所述黃酮類(lèi)化合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的黃酮類(lèi)化合物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟: a. 制備煙草提取物浸膏:以晾曬煙葉片為原料,將其粉碎并用第一溶劑浸泡提取2~ 4次,每次浸泡12h~72h,將提取液合并,過(guò)濾,濾液濃縮后得到所述煙草提取物浸膏;其中 所述第一溶劑為濃度為60wt%~lOOwt%的乙醇、甲醇或丙酮的水溶液,且每次提取用的 第一溶劑的重量與晾曬煙葉片的重量比=1. 5~4:1 ; b. 硅膠柱層析:將步驟a得到的煙草提取物浸膏用純甲醇、純乙醇或純丙酮溶解后,與 為煙草提取物浸膏的0. 8~2. 5重量倍的60~120目硅膠拌樣,得到拌樣后的混合物; 將為煙草提取物浸膏的2~8重量倍的160~300目硅膠干法裝柱后,將拌樣后的混 合物上樣,然后用體積比依次為10:0、9:1、8:2、7:3、6:4和5:5的氯仿-甲醇的混合溶劑作 為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫,收集其中用體積比為9:1的氯仿-甲醇的混合溶劑洗脫時(shí)得到的 洗脫液,稱(chēng)為第一洗脫液; 將上述第一洗脫液用硅膠層析柱繼續(xù)分離,用體積比從15:1線性變化至2:1的氯 仿-丙酮的混合溶劑作為洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫,薄層層析色譜跟蹤,將其先后劃分成6個(gè)部 分,其中第二個(gè)部分稱(chēng)為第二洗脫液;將上述第二洗脫液用硅膠柱層析繼續(xù)分離,洗脫劑為 石油醚-乙酸乙酯的混合溶劑,洗脫梯度的體積比為從9:1線性變化至5:5,薄層層析色譜 跟蹤,將其先后劃分成5個(gè)部分,其中第三部分稱(chēng)為第三洗脫液; c. 高壓液相色譜分離:將步驟b得到的第三洗脫液通入高壓液相色譜進(jìn)行分離純化, 該高壓液相色譜采用21. 2mmX250mm,5ym的C18色譜柱,流動(dòng)相為60wt%的甲醇水溶液,流 動(dòng)相流速為12mL/min,紫外檢測(cè)器檢測(cè)波長(zhǎng)為371nm,第三洗脫液液每次進(jìn)樣60~150yL, 收集每次進(jìn)樣后色譜峰保留時(shí)間為28. 2min時(shí)所對(duì)應(yīng)的洗脫液,稱(chēng)為第四洗脫液,將該第 四洗脫液脫除溶劑后即得所述黃酮類(lèi)化合物。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的黃酮類(lèi)化合物的制備方法,其特征在于,所述高壓液相色 譜分離是指使用時(shí)壓力在5-15Mpa的反相制備色譜。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的黃酮類(lèi)化合物的制備方法,其特征在于,還包括以下進(jìn) 一步提純的步驟:將在所述高壓液相色譜分離之后得到的所述黃酮類(lèi)化合物再次溶于純甲 醇,并以純甲醇的為流動(dòng)相,通過(guò)葡聚糖凝膠柱進(jìn)行層析分離,提到進(jìn)一步提純的所述異黃 酮類(lèi)化合物。
6. 權(quán)利要求1所述的黃酮類(lèi)化合物在制備抗輪狀病毒藥物中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種結(jié)構(gòu)新穎的黃酮類(lèi)化合物,該化合物命名為煙草黃酮-E,其分子式為C21H16O5,且具有如式(Ⅰ)所示的結(jié)構(gòu):式(Ⅰ)。本發(fā)明還公開(kāi)了上述化合物的用途,經(jīng)活性測(cè)試表明,其對(duì)輪狀病毒具有很好的抑制作用。本發(fā)明化合物結(jié)構(gòu)新穎,且具有較好的抗毒活性,可作為抗輪狀病毒的先導(dǎo)化合物用于抗輪狀病毒藥物制劑研發(fā)。
【IPC分類(lèi)】A61P31-12, C07D493-04
【公開(kāi)號(hào)】CN104844615
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510170058
【發(fā)明人】楊光宇, 申欽鵬, 劉春波, 張鳳梅, 何沛, 張濤, 司曉喜, 劉志華, 朱瑞芝, 王昆淼, 蘇鐘璧, 繆明明
【申請(qǐng)人】云南中煙工業(yè)有限責(zé)任公司
【公開(kāi)日】2015年8月19日
【申請(qǐng)日】2015年4月11日