本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域,具體地說(shuō),涉及一種腫瘤壞死因子舌下給藥制劑及其制備方法。
背景技術(shù):
:腫瘤壞死因子α(TumorNecrosisFactorα簡(jiǎn)稱TNFα)是由激活的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的一種多功能細(xì)胞因子。人的有活性的TNFα由3個(gè)分子量為17KDa的非糖蛋白單體構(gòu)成單體呈片層折疊結(jié)構(gòu),它們之間通過(guò)一個(gè)Cys69-Cys101間的二硫鍵非共價(jià)組成體。不同種屬哺乳動(dòng)物來(lái)源的TNFα在一級(jí)結(jié)構(gòu)上具有極高的同源性,在生物學(xué)活性上也無(wú)明顯的種屬特異性。純化的TNFα等電點(diǎn)在5.3左右;pH6-8時(shí)穩(wěn)定;對(duì)酸敏感:對(duì)蛋白水解酶(胰蛋白酶、糜蛋白酶等)敏感;50%的飽和硫酸銨可使其沉淀。在反復(fù)凍融和無(wú)保護(hù)劑時(shí),室溫下失活。TNFα基因?yàn)閱慰截惢颉H说幕虼笮?.67kb,定位于人第6號(hào)染色體。基因組由4個(gè)外顯子和3個(gè)內(nèi)含子組成;編碼一個(gè)由233個(gè)氨基酸組成的前體蛋白、其前76個(gè)氨基酸為信號(hào)肽、使TNFα前體能跨膜存在于細(xì)胞膜上,通過(guò)降解后,分出含157個(gè)氨基酸的成熟蛋白、糖基化。人TNFα基因第1外顯子編碼81%的信號(hào)肽,第4外顯子編碼89%成熟型TNFα氨基酸序列。用TNFα對(duì)腫瘤作臨床的免疫治療是幾十年來(lái)發(fā)展較快的新型抗瘤療法、對(duì)臨床手術(shù)、放療、化療等常規(guī)手段是有效補(bǔ)充。這在美國(guó)、日本和德國(guó)都取得了較好的進(jìn)展。美國(guó)的Genentech公司在臨床試驗(yàn)中用TNFα治療乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌等方面居于領(lǐng)先地位;Cetus公司把TNFα和IL-2聯(lián)用開(kāi)創(chuàng)了復(fù)合生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑法。日本的重組產(chǎn)品已進(jìn)入臨床試驗(yàn),對(duì)胸、腹水晚期轉(zhuǎn)移癌、大腸癌、膽囊癌等取得了好的進(jìn)展。德國(guó)BASF公司年產(chǎn)可達(dá)500g,德國(guó)用TNFα在胃腸道腫瘤、肝癌、卵巢腫瘤、乳腺癌等方面取得了成功,尤其在控制癌性胸腹水方面的療效居世界前列。我國(guó)衛(wèi)生部1998年初已批準(zhǔn)上海、西安的5家單位開(kāi)始臨床試驗(yàn)。臨床上給藥途徑早年多為靜脈、肌肉和皮下注射,近年來(lái)為了減輕TNFα的毒性,常采用局部注射或局部灌注方法,治療中、晚期腫瘤。給藥量從10μg/m2到400μg/m2。較多的治療方案是2周為1療程,每個(gè)療程中連續(xù)5天給藥,每天給50μg/m2。給藥量主要取決于藥效,通常80萬(wàn)單位/m2有效。雖然1975年已分離、純化了TNFα,并闡明了結(jié)構(gòu),1985年已經(jīng)用大腸桿菌基因工程達(dá)到了TNFα的重組產(chǎn)品;但是至今TNFα還停留在臨床階段,世界各國(guó)的醫(yī)藥行政部門(mén)都未批準(zhǔn)TNFα作為商品藥在市場(chǎng)上出售。這主要由于從最初的臨川試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn),TNFα有嚴(yán)重的全身毒性作用,對(duì)人的毒性作用要比小鼠高20倍。這種毒性作用主要表現(xiàn)在:發(fā)熱(35-100%),寒顫(70-100%),惡心頭痛(20-70%)。乏力(20-77%)、食欲下降(24-46%);還發(fā)生腹瀉、血小板降低、白細(xì)胞減少、GTP上升、體液潴留、肌痛,甚至內(nèi)毒素性休克。這就大大限制了TNFα的臨床應(yīng)用劑量,嚴(yán)重影響其治療腫瘤的效果。至今能選擇性地、又直接殺傷腫瘤的藥物很少,癌癥的死亡率仍高于其他各種疾病。TNFα被發(fā)現(xiàn)后大家對(duì)其抱有極大的希望。但全身毒性的嚴(yán)重性,限制了它的應(yīng)用。十幾年來(lái)各國(guó)學(xué)者正在千方百計(jì)降低TNFα的毒性,主要從兩方面取得了一些進(jìn)展:第一方面是改變給藥途徑,1990年前后,美國(guó)曾經(jīng)試驗(yàn)用基因治療,即把TNFα直接注入腫瘤組織。第二方面是用蛋白質(zhì)工程技術(shù)對(duì)TNFα的結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造,改造的目的是降低毒性和提高抗腫瘤。十幾年來(lái)已突變成功了數(shù)十種TNFα,其中有些毒性有明顯得下降,而抗腫瘤活性有顯著提高。雖然如此,各國(guó)仍然還在作臨床試驗(yàn)。針對(duì)目前存在的上述問(wèn)題,CN00109459.9公開(kāi)了一種人腫瘤壞死因子α口服劑,含有表達(dá)人腫瘤壞死因子α(hTNFα)的念珠藻,降低了毒性,并可直接作用于消化道。本申請(qǐng)人研發(fā)的注射用改構(gòu)重組人腫瘤壞死因子(商品名:天恩福)為國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局(SFDA)批準(zhǔn)的國(guó)家生物制品I類新藥,是在腫瘤壞死因子原液中加入人血白蛋白和甘露醇經(jīng)凍干得到的白色疏松粉末,主要用于治療惡性淋巴瘤、肺癌、惡性黑色素瘤、惡性胸腹水,具有廣闊的應(yīng)用前景。然而,在長(zhǎng)期的使用中發(fā)現(xiàn)其毒副反應(yīng)大,穩(wěn)定性不好。有鑒于此特提出本發(fā)明。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,提供一種腫瘤壞死因子舌下給藥制劑及其制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:一種腫瘤壞死因子舌下給藥制劑,其中,所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑包括如下組分:優(yōu)選,所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑包括如下組分:更優(yōu)選,所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑包括如下組分:進(jìn)一步的,所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑為凍干粉末。本發(fā)明的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑用藥方便,臨用前加入生理鹽水復(fù)溶,滴入舌下即可,病人帶藥回家就能用(原靜脈給藥,必須去醫(yī)院靜脈滴注),毒副作用小,采用滴入舌下給藥,避免了靜脈給藥的毒副反應(yīng)大等缺點(diǎn)。本發(fā)明還提供所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑的制備方法,其中,所述的制備方法為:先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后再加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。進(jìn)一步的,加入腫瘤壞死因子原液時(shí),控制溫度在2~8℃。進(jìn)一步的,在凍干前,將溶液的pH值調(diào)節(jié)至中性。進(jìn)一步的,pH值調(diào)節(jié)用磷酸緩沖液。本發(fā)明中,所述的腫瘤壞死因子原液可參照現(xiàn)有技術(shù)的方法制備得到,如CN03129262.3所公開(kāi)的一種重組改構(gòu)人腫瘤壞死因子的生產(chǎn)方法,也可采用如下方法得到:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步精制純化,得到的蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至0~10℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用10~60min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫2~4h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫10~14h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫6~10h。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):(1)與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明增加軟磷脂、明膠和甘氨酸后,產(chǎn)品穩(wěn)定性增加,并添加了有助于吸收的甘氨酸,有利藥物快速進(jìn)入血液,發(fā)揮作用;(2)較現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑不僅療效增加,而且無(wú)不良反應(yīng)發(fā)生;(3)本發(fā)明方法工藝簡(jiǎn)單,適于工業(yè)化大生產(chǎn)。具體實(shí)施方式為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚,下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例,對(duì)實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,以下實(shí)施例用于說(shuō)明本發(fā)明,但不用來(lái)限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1處方:制備方法:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,離心得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步、精制純化,得到的高純度蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后在溫度2℃下加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至中性,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至0℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用10min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫2h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫10h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫6h。實(shí)施例2處方:制備方法:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,離心得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步、精制純化,得到的高純度蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后在溫度8℃下加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至中性,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至10℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用60min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫4h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫14h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫10h。實(shí)施例3處方:制備方法:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,離心得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步、精制純化,得到的高純度蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后在溫度4℃下加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至中性,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至5℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用30min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫3h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫12h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫8h。實(shí)施例4處方:制備方法:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,離心得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步、精制純化,得到的高純度蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后在溫度6℃下加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至中性,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至3℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用35min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫2.5h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫11h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫7h。實(shí)施例5處方:制備方法:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,離心得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步、精制純化,得到的高純度蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后在溫度6℃下加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至中性,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至8℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用45min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫3.5h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫13h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫8h。實(shí)施例6處方:腫瘤壞死因子工程菌經(jīng)過(guò)發(fā)酵,離心得到菌體,勻漿破菌,硫酸銨沉淀,離心得到目的蛋白,再經(jīng)過(guò)初步、精制純化,得到的高純度蛋白質(zhì)液體即為腫瘤壞死因子原液。先將甘露醇、軟磷脂、明膠和甘氨酸配成溶液,混勻,再加入人血白蛋白,混勻,然后在溫度6℃下加入腫瘤壞死因子原液,混合均勻,用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)pH值至中性,凍干,即得所述的腫瘤壞死因子舌下給藥制劑。所述的凍干分為預(yù)凍、一次干燥和二次干燥三個(gè)階段:預(yù)凍:制品進(jìn)箱前,隔板先降溫至7℃,然后將制品放入冷凍干燥箱中,用18min將隔板溫度降至-45±2℃,制品溫度達(dá)-40℃±2℃,繼續(xù)保溫2.8h;一次干燥:將隔板溫度升溫至5℃±2℃,保溫待制品冰晶完全消失后,繼續(xù)保溫12h;對(duì)整個(gè)系統(tǒng)抽真空,真空度達(dá)350±5mbar;二次干燥:將隔板溫度升溫至30℃±2℃,制品溫度達(dá)25℃±2℃,保溫9h。對(duì)比例1、注射用改構(gòu)重組人腫瘤壞死因子處方:制備方法:同實(shí)施例1,所不同的是處方中不含有軟磷脂、明膠和甘氨酸。試驗(yàn)例1、穩(wěn)定性試驗(yàn)取96孔板,加入細(xì)胞數(shù)量為2.5~3×105個(gè)/ml,細(xì)胞板加入樣品和標(biāo)準(zhǔn)品后做四倍稀釋,做復(fù)孔,培養(yǎng)20~24小時(shí)后在測(cè)量波長(zhǎng)570nm,參照波長(zhǎng)630nm,測(cè)量每孔的OD值。以第幾孔為橫坐標(biāo),孔內(nèi)細(xì)胞量相對(duì)應(yīng)的OD值為縱坐標(biāo)。根據(jù)細(xì)胞死亡率,用MTT染色,死亡越多,顏色越淡,采用直線回歸計(jì)算法進(jìn)行處理。分別計(jì)算各試驗(yàn)樣品的半效稀釋倍數(shù)(即從樣品溶液至相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)品50%最大效應(yīng)點(diǎn)的稀釋倍數(shù)),并按下式計(jì)算試驗(yàn)結(jié)果:經(jīng)過(guò)MTT法活性測(cè)定,結(jié)果如下:實(shí)驗(yàn)方法,各加1毫升生理鹽水,室溫放置1小時(shí)。MTT法測(cè)定各自活性(原活性85萬(wàn)單位)。1、對(duì)比例1的產(chǎn)品活性52萬(wàn)單位;2、增加軟磷脂、明膠和甘氨酸后的實(shí)施例1的產(chǎn)品的活性80萬(wàn)單位。從上述試驗(yàn)結(jié)果可以看出,本發(fā)明產(chǎn)品在室溫下活性穩(wěn)定性明顯優(yōu)于對(duì)比例1的產(chǎn)品的活性穩(wěn)定性,是對(duì)比例1的產(chǎn)品活性的1.54(80/52)倍。同時(shí),按照上述方法,將實(shí)施例1的產(chǎn)品和對(duì)比例1的產(chǎn)品各加1毫升生理鹽水,在口腔溫度37℃下放置1小時(shí)。MTT法測(cè)定各自活性(原活性85萬(wàn)單位)。1、對(duì)比例1的產(chǎn)品活性46萬(wàn)單位;2、增加軟磷脂、明膠和甘氨酸后的實(shí)施例1的產(chǎn)品的活性76萬(wàn)單位。從上述試驗(yàn)結(jié)果可以看出,本發(fā)明產(chǎn)品在口腔溫度37℃下活性穩(wěn)定性明顯優(yōu)于對(duì)比例1的產(chǎn)品的活性穩(wěn)定性,是對(duì)比例1的產(chǎn)品活性的1.65(76/46)倍。試驗(yàn)例2、臨床試驗(yàn)一、資料與方法1、病例選擇入選標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)證實(shí)的中晚期肺癌、頭頸部腫瘤、胃癌、結(jié)腸癌、泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤患者;年齡35~70歲,心、肝、腎等臟器功能基本正常;白細(xì)胞≥4.0×109·L-1,血小板≥100×109·L-1,血紅蛋白≥90g·L-1;KPS≥30分,預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月;至少有1個(gè)可評(píng)價(jià)病灶,近1月內(nèi)未進(jìn)行其他抗腫瘤治療;上述患者均簽署書(shū)面知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):可進(jìn)行并愿意接受手術(shù)治療的早期惡性腫瘤患者;有明顯心、肝、腎功能障礙及血液系統(tǒng)疾病患者;對(duì)肽類藥物或其他生物制品有過(guò)敏史、或有過(guò)敏性疾病患者及過(guò)敏體質(zhì)者;孕婦、哺乳期婦女。剔除標(biāo)準(zhǔn):用藥劑量、化療方案、治療療程不符合本研究要求者;因各種原因未完成給藥計(jì)劃者(因不良反應(yīng)停藥者不納入療效分析,但納入不良反應(yīng)統(tǒng)計(jì));試驗(yàn)期間加用其他藥物影響本試驗(yàn)療效觀察者。共入組120例,其中試驗(yàn)組60例,對(duì)照組60例;因各種原因出組7例,其中試驗(yàn)組1例,對(duì)照組6例,全組可評(píng)價(jià)療效及不良反應(yīng)者均為113例。試驗(yàn)組59例患者中,男53例,女6例;中位年齡(56.58±9.68)歲。既往治療20例。KPS評(píng)分平均為77.86±7.69。59例中肺癌28例,消化道腫瘤18例,泌尿道腫瘤7例,頭頸部腫瘤6例。臨床分期:II期3例,III期20例,IV期36例;對(duì)照組54例患者中,男37例,女17例,中位年齡(55.91±15.72)歲。既往治療16例。KPS評(píng)分平均為77.36±9.21。肺癌32例,消化道腫瘤22例。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,2組患者在性別、年齡、既往治療、KPS評(píng)分、病種及臨床分期方面均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2、給藥方法試驗(yàn)組:實(shí)施例1的舌下給藥制劑加聯(lián)合化療。用量為400萬(wàn)IU·m-2,d1~d7,d1~d17,舌下給藥,21d為1個(gè)周期,連用2個(gè)周期。聯(lián)合化療方案:肺癌GP方案(Gem1200mg/m2iv,d1,d8DDP80-100mg/m2ivd2);胃癌奧沙利鉑+卡培他濱(奧沙利鉑130mg·m-2,iv,d1;卡培他濱1000mg·m-2,bid,po,d1-14);腸癌XELOX方案(奧沙利鉑130mg·m-2,iv,d1;卡培他濱1000mg·m-2,bid,po,d1-14);頭頸部腫瘤PF方案(順鉑100mg·m-2,iv,d1;5-Fu1000mg·m-2,iv,d1-4);泌尿道腫瘤方案同結(jié)腸癌。對(duì)照組:對(duì)比例1的注射用改構(gòu)重組人腫瘤壞死因子肌注加聯(lián)合化療。用量為400萬(wàn)IU·m-2,d1~7,d1~17,im,21d為1個(gè)周期,連用2個(gè)周期。聯(lián)合化療方案同試驗(yàn)組。3、觀察指標(biāo)臨床指標(biāo):每天記錄癥狀、體征;每日測(cè)體溫、血壓1次,如高熱加測(cè)體溫并記錄最高值;每日觀察并記錄乏力、流涕、畏寒等感冒樣癥狀程度及骨、肌肉疼痛程度;詳細(xì)記錄TNFα給藥后的局部不良反應(yīng),如注射部位的疼痛程度、紅腫硬節(jié)范圍,有無(wú)皮疹及出血點(diǎn),有無(wú)痔瘡或潰瘍等并記錄其他不良反應(yīng)如過(guò)敏反應(yīng)等。同時(shí)判斷與藥物的相關(guān)性。實(shí)驗(yàn)室指標(biāo):治療前及治療開(kāi)始后每周查血常規(guī);每周期治療前后查肝、腎功能、尿常規(guī)、心電圖、肝臟B超及胸部X光片;除可直接測(cè)量的腫瘤病灶外,對(duì)評(píng)價(jià)病灶均需治療前和治療結(jié)束后4周各行CT檢測(cè)1次。4、療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)可測(cè)量病灶評(píng)價(jià)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn):CR可測(cè)量病灶完全消失,至少維持4周以上;PR腫塊縮小50%以上,時(shí)間不少于4周;MR腫瘤病灶的兩徑乘積縮小≥25%,但<50%,無(wú)新病灶出現(xiàn);SD腫瘤病灶的兩徑乘積縮?。?5%,或增加<25%,無(wú)新病灶出現(xiàn);PD腫瘤病灶兩徑乘積增大≥25%,或新病灶出現(xiàn);有效率為CR+PR病例占全部病例的百分?jǐn)?shù)。骨肌肉疼痛程度及注射局部疼痛判定標(biāo)準(zhǔn)參照疼痛主訴分級(jí)法(VerbalRatingScale,VRS)判定。0級(jí):無(wú)疼痛;Ⅰ級(jí):輕度疼痛,有疼痛感,可忍受,能正常生活,睡眠末受干擾;Ⅱ級(jí):中度疼痛,疼痛明顯,不能忍受,要求用止痛藥,睡眠受干擾;Ⅲ級(jí):重度疼痛,疼痛劇烈,可伴有植物神經(jīng)功能紊亂表現(xiàn),或被動(dòng)體位,睡眠受?chē)?yán)重干擾,須用止痛治療。注射部位紅腫硬結(jié)標(biāo)準(zhǔn):以紅腫結(jié)節(jié)的最大徑線的長(zhǎng)度(單位為cm)表示。0度:無(wú)紅腫硬結(jié);Ⅰ度:紅腫硬結(jié)最大徑≤1cm;Ⅱ度:紅腫硬節(jié)最大徑1.1~2.0cm;Ⅲ度:紅腫硬結(jié)最大徑>2.0cm。乏力及感冒樣癥狀按無(wú)、輕度、中度及重度,Ⅳ度判定。5、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法一般資料比較用ⅹ2檢驗(yàn)、F檢驗(yàn)和等級(jí)秩和檢驗(yàn);臨床療效比較用ⅹ2檢驗(yàn)和t檢驗(yàn);不良反應(yīng)發(fā)生率用ⅹ2檢驗(yàn)和F檢驗(yàn)。二、結(jié)果1、療效分析試驗(yàn)組有效率為44.0%(26/59);對(duì)照組有效率為40.7%(22/54),如表1所示,試驗(yàn)組有效率高于對(duì)照組。表1、近期療效比較分組例數(shù)CRPRMRSDPDCR+PRRR/%試驗(yàn)組5981771882542.4對(duì)照組5481452162240.72、藥物不良反應(yīng)與TNFα有關(guān)的不良反應(yīng)主要為輕度注射部位疼痛、紅腫硬結(jié)、發(fā)熱及感冒樣癥狀,試驗(yàn)組為舌下給藥,經(jīng)試驗(yàn)表明無(wú)不良反應(yīng)發(fā)生,而對(duì)照組不良反應(yīng)總發(fā)生率為72.22%(39/54),見(jiàn)表2。表2、與TNFα相關(guān)的不良反應(yīng)不良反應(yīng)第1周期(n=54)(%)第2周期(n=54)(%)注射部位疼痛36(66.67)39(72.22)紅腫硬結(jié)12(22.22)24(44.44)發(fā)熱21(38.89)15(27.78)感冒樣癥狀2(3.70)3(5.56)從上述試驗(yàn)結(jié)果可以看出,本發(fā)明的舌下給藥制劑與注射用改構(gòu)重組人腫瘤壞死因子肌注給藥制劑相比,有效率雖然提高不多,但本發(fā)明的舌下給藥制劑無(wú)不良反應(yīng)發(fā)生,且用藥方便、安全。對(duì)本發(fā)明其它實(shí)施例所制備的舌下給藥制劑也進(jìn)行了上述試驗(yàn),其獲得的結(jié)果相似。以上所述僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已,并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制,雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例揭露如上,然而并非用以限定本發(fā)明,任何熟悉本發(fā)明的技術(shù)人員在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍內(nèi),當(dāng)可利用上述提示的技術(shù)內(nèi)容作出些許變動(dòng)或修飾為等同變化的等效實(shí)施例,但凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容,依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與修飾,均仍屬于本發(fā)明方案的范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3