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一種人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒及應(yīng)用的制作方法

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技術(shù)特征:

1.一種人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫定量測(cè)定試劑盒,包括盒體、設(shè)在盒體內(nèi)的化學(xué)發(fā)光板和設(shè)在盒體內(nèi)的試劑,其特征在于:化學(xué)發(fā)光板包被有抗HE4的抗體;試劑包括:HE4系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液,HE4系列質(zhì)控品溶液,樣本稀釋液,生物素標(biāo)記抗HE4抗體,辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的鏈酶親和素,酶稀釋液,化學(xué)發(fā)光溶液A、B液,濃縮洗滌液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:所述的化學(xué)發(fā)光板為乳白色不透明聚苯乙烯96孔化學(xué)發(fā)光板,各孔包被有抗HE4的抗體,抗體包被濃度為5.0 μg/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:試劑盒的檢測(cè)樣本為人血清樣本。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:HE4系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度分別為:0、50、70、250、500、1800 pmol/L。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:HE4系列質(zhì)控品溶液濃度分別為:250±80、70±14pmol/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:生物素標(biāo)記抗HE4抗體由HE4抗體與生物素偶合制成,并作為檢測(cè)抗體。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:濃縮洗滌液是含有體積分?jǐn)?shù)0.05 %吐溫-20的pH=7.4,0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:化學(xué)發(fā)光溶液A液為魯米諾含量為0.01M、對(duì)甲苯酚含量為0.001M pH=8.8的三(羥甲基)氨基甲烷溶液;化學(xué)發(fā)光溶液B液為每 100 mL溶液含檸檬酸2.1g,無(wú)水 Na2HPO4 2.82g,0.75%的過(guò)氧化氫脲 0.64mL 的水溶液,所述百分比為質(zhì)量百分比。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于:包括如下試劑:

HE4標(biāo)準(zhǔn)品溶液:將HE4抗原純品用抗原稀釋液配制成濃度分別為0、50、70、250、500、1800 pmol/L的HE4系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液;

HE4質(zhì)控品溶液:將HE4抗原純品用抗原稀釋液配制成濃度分別為250、70 pmol/L的質(zhì)控品溶液;

生物素標(biāo)記抗HE4抗體:將生物素與抗體進(jìn)行偶聯(lián)透析后獲得的生物素標(biāo)記抗HE4抗體,用抗體稀釋液稀釋成1:2000 的工作濃度作為檢測(cè)抗體;

抗原稀釋液:為含有BSA,蔗糖的0.05 mol/L磷酸鹽緩沖液,pH=7.4,是每升含有20 g BSA,50 g蔗糖,8 g NaCl,0.2 g KCl,0.24 g KH2PO4,1.44 g Na2HPO4的水溶液;

抗體稀釋液:為含有蔗糖的0.05 mol/L磷酸鹽緩沖液,pH=7.4,是每升含有50 g蔗糖,8 g NaCl,0.2 g KCl,0.24 g KH2PO4,1.44 g Na2HPO4的水溶液;

化學(xué)發(fā)光溶液:A液為魯米諾含量為 0.01M、對(duì)甲苯酚含量為 0.001M,pH=8.8的三(羥甲基)氨基甲烷溶液,B液為每100mL溶液含檸檬酸2.1g,無(wú)水Na2HPO4 2.82g,0.75%的過(guò)氧化氫脲 0.64mL 的水溶液;

濃縮洗滌液:按體積分?jǐn)?shù)0.05%將吐溫-20添加至pH=7.4, 0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液中;

包被溶液:1.59 g 碳酸鈉和 2.53 g 碳酸氫鈉溶于1 L水中,調(diào)節(jié)pH=9.5;

封閉溶液: 10 g BSA 溶于 1L 洗滌溶液中,再加入重量比為 5‰的 P300;

標(biāo)記液:1.59 g 碳酸鈉和 2.53 g 碳酸氫鈉溶于1 L水中,調(diào)節(jié)pH=9.5;

透析液:0.24 g磷酸二氫鈉、1.44g磷酸氫二鈉、8g氯化鈉、0.2g氯化鉀溶于1L水中,調(diào)節(jié)PH=7.4。

10.權(quán)利要求1-9任意一項(xiàng)所述的人附睪蛋白4化學(xué)發(fā)光酶免疫檢測(cè)試劑盒作為卵巢癌的輔助診斷、監(jiān)測(cè)疾病狀態(tài)、反映治療療效的試劑的應(yīng)用。

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